蟲(chóng)媒病毒在全世界范圍內持續引發(fā)疫情，對人類(lèi)生命健康造成較大影響，但特異性防治手段卻極其有限。發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒（Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome Virus ，SFTSV）是近年來(lái)在亞洲國家持續流行的新型布尼亞病毒，其經(jīng)蜱蟲(chóng)叮咬實(shí)現跨種傳播，在蜱蟲(chóng)活動(dòng)季節如5-8月份引發(fā)感染高峰。人感染后的典型癥狀為持續性發(fā)熱、胃腸道不適、白細胞及血小板數目顯著(zhù)下降，嚴重者會(huì )出現多器官衰竭甚至死亡。近年來(lái)，SFTSV由山林、農村地區向城郊傳播，在亞洲以外的國家如希臘、阿拉伯和美國等地也出現類(lèi)似病例，其總體流行區域呈現擴大化。然而，針對SFTSV感染臨床僅以支持性治療為主，目前尚無(wú)獲批的特異性藥物或疫苗。中國科學(xué)院武漢病毒研究所肖庚富/潘曉彥團隊和珠海麗凡達生物技術(shù)有限公司共同研制了一款SFTSV全長(cháng)Glycoprotein（GP） mRNA疫苗，并對該疫苗的保護機制和預防效果進(jìn)行了深入研究和評價(jià)。相關(guān)工作近期在國際專(zhuān)業(yè)病毒學(xué)期刊Journal of Virology（JVI）在線(xiàn)發(fā)表。

SFTSV基因組由L，M和S片段組成，其中M片段編碼囊膜糖蛋白前體GP，GP在內質(zhì)網(wǎng)中被加工成Gn/Gc異二聚體（在感染新的宿主細胞時(shí)，Gn負責與受體結合，Gc則介導膜融合），該二聚體在高爾基體中進(jìn)一步形成非均質(zhì)的五聚體和六聚體，并包裹病毒遺傳物質(zhì)組裝成完整病毒粒子，病毒粒子通過(guò)囊泡運送至胞膜并釋放。因此，SFTSV GP主要是在胞內表達成熟，且在胞內完成組裝，促進(jìn)病毒粒子胞間傳遞。鑒于成熟SFTSV囊膜蛋白結構的復雜性，體外重組表達具有天然構象的囊膜蛋白難以實(shí)現，因此過(guò)往研究中基于Gn/Gc制備的重組蛋白亞單位疫苗難以提供有效體內保護。本研究正是基于Gn/Gc的功能特性和GP的表達特性，試圖利用mRNA疫苗的原位表達優(yōu)勢再現GP的天然表達過(guò)程，利用未經(jīng)改造的全長(cháng)GP mRNA疫苗，誘導針對GP的真實(shí)免疫反應進(jìn)而為SFTSV感染提供保護作用，在疫苗設計上做減法。

經(jīng)過(guò)體外哺乳動(dòng)物細胞表達驗證，全長(cháng)GP mRNA疫苗可在胞內有效表達。免疫原性測試結果表明，該疫苗可在小鼠體內誘導產(chǎn)生高滴度針對SFTSV Gn和Gc的特異性結合抗體，并對SFTSV活病毒產(chǎn)生高效中和作用；特別值得注意的是，該疫苗顯著(zhù)誘導T細胞免疫反應，表現為T(mén)h 1偏向型細胞免疫應答，并促進(jìn)記憶性效應T細胞（memory effector T cells，Tem）的生成。攻毒保護結果表明，1 μg該疫苗即可為致死劑量攻毒的A129小鼠提供100%保護，0.1 μg亦可提供90%保護，并有效避免病毒感染引發(fā)的組織損傷，該結果在腹腔攻毒和肌肉攻毒模型中均得到了驗證。另外，該疫苗誘導的免疫反應和保護作用在5個(gè)月內未見(jiàn)明顯減弱，預示其潛在的長(cháng)效保護作用。

（A-B：BALB/c小鼠經(jīng)過(guò)不同劑量GP mRNA疫苗接種后，體內體液免疫和細胞免疫應答情況；C：A129小鼠接種不同劑量疫苗后，經(jīng)腹腔和肌肉途徑實(shí)施致死劑量SFTSV攻毒，其體重及存活情況）

重要的是，該全長(cháng)GP mRNA疫苗對SFTSV同屬病原哈特蘭病毒（Heartland Virus，HRTV）和具有潛在致病風(fēng)險的古爾圖病毒（Guertu Virus，GTV）亦具有完全交叉保護作用，且該保護作用是在無(wú)交叉結合或中和抗體的情況下發(fā)生的。進(jìn)一步研究發(fā)現，來(lái)源于SFTSV GP的保守肽段可能誘導T細胞免疫進(jìn)而介導該保護作用的發(fā)生。本研究不僅鑒定了班達病毒屬（Bandavirus）病原的潛在交叉保護T細胞表位，同時(shí)也鑒定了一系列SFTSV GP來(lái)源的白纖病毒科（Phenuiviridae）潛在T細胞表位，提示SFTSV GP全長(cháng)提供廣譜表位和廣譜保護作用的可能性。

（A：AG129或A129小鼠接種疫苗后，經(jīng)腹腔和肌肉途徑實(shí)施致死劑量HRTV或GTV攻毒，小鼠存活率情況；B：班達病毒屬和白纖病毒科病原在布尼亞病毒目中的進(jìn)化位置；C: 來(lái)源于SFTSV全長(cháng)GP的保守表位分析；D: SFTSV GP的潛在T細胞保護性表位鑒定）

總之，該研究證明了基于全長(cháng)SFTSV GP構建的mRNA疫苗對SFTSV感染的高效保護性，并證明了其對班達病毒的廣譜交叉保護作用，提示其良好的應用前景。此外，該研究強調了T細胞免疫在介導班達病毒疫苗保護中的重要性，并提示基于保守T細胞表位設計廣譜疫苗的潛在可行性。

該工作主要由武漢病毒所博士生陸嘉和珠海麗凡達生物技術(shù)有限公司劉雋博士共同完成，武漢病毒所潘曉彥青年研究員、肖庚富研究員及珠海麗凡達生物技術(shù)有限公司彭育才博士為本文通訊作者。武漢病毒所鄧菲研究員和鄧增欽研究員為該研究提供了寶貴的實(shí)驗材料。該研究得到中國科學(xué)院青促會(huì )項目和武漢市知識創(chuàng )新專(zhuān)項的支持。